菌种冻干机的介绍及使用步骤

 

　　骏德仪器实验室菌种冻干机FD-304是一款专门针对菌种保存而设计的冻干机。利用安剖管架预冻好的样品直接转移摆放到冻干仓隔板上即可，容量大，操作简便。316L医用级不锈钢材质方形冻干仓，隔热保温效果好，真空性能好，有效避免样品因干燥过程中升温过快而发生样品外形塌陷，活性降低等问题。是研究菌种保存客户的理想选择。

 

　　冷冻干燥是将菌体悬浮液冷冻到冰点以下，从而转变为固体结晶态，然后在低温低压(真空)下使固体升华而脱水的干燥方法。一般干燥处理过程会破坏微生物的细胞膜，引起细胞的大量死亡，因此需要添加保护剂，能够使菌液密度均一，减少活菌在冻干过程中的机械效应和溶质效应带来的死亡。因此，在冻干前加入的保护剂配方就成为了至关重要的决定性因素，它既会影响到储存期细胞的活性以及稳定性，也会影响到复水时细胞存活率。

 

　　冻干法是长期保存细菌、酵母、真菌、病毒和立克次氏体的标准方法(在冻干前一般要加冷冻保护剂，这样可使细胞免除在冷冻初期因形成冰晶而造成的损害。ATCC 常规用10%脱脂奶或12%蔗糖作为冷冻保护剂，而美国农业部(USDA)的农业研究服务机构的实验人员用牛或马血清作为微生物的冷冻保护剂(。在菌液中加入甘油和二甲亚砜(DMSO)也可防止冷冻中微生物的死亡，但实际操作中应根据不同微生物决定应用或不用保护剂。

 

保存菌种的步骤主要包括：

 

　　1、微生物培养，培养获得健壮的菌种扩培液体。培养时根据菌种选择不同的培养基。培养到对数期获得大量健壮的菌种，保证菌体浓度，一般达到109的浓度.

 

　　2、离心收集菌体。通过离心法从液体培养基中获得菌体。如果是固体培养基可以直接收集菌落，用保护剂溶解混匀。

 

　　3、将菌体、脱脂奶粉、海藻糖、蔗糖等保护剂在无菌水中混匀得到含有保护剂的菌体混悬液。

 

　　4、分装。将菌体混悬液在无菌环境中分装到无菌容器中，可以是安瓿瓶、西林瓶、EP、培养皿等。

 

　　5、预冻，预冻是非常关键的。预冻不好，菌体会死亡。要快速预冻，防止产生大冰晶造成细胞死亡。预冻要冻结实，保证预冻充分。

 

　　6、将预冻好的菌体，放入真空冷冻干燥设备中进行冻干。如果是设备带预冻功能，也可以直接在冻干机上进行预冻。真空冷冻干燥时间和冻干曲线的 设计要根据菌种的不同和菌体混悬液的浓度等进行设计。冻干好后真空密封保存。